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CRSPER- dCas9系统

CRISPR-dCas9系统

   

 dCas9蛋白是Cas9蛋白的突变体,即Cas9内切酶的RuvC1 HNH两个核酸酶活性区域同时发生突变。因此,dCas9蛋白的内切酶活性全部消失,只保留由gRNA引导进入基因组的能力。


    CRISPR-dCas9系统提供了一个研究定点转录调控的平台在这个平台中dCas9主要是与其他效应蛋白融合(如GFP、转录因子、组蛋白修饰等),进行基因调控,基因组成像,染色质或DNA修饰以及染色质免疫沉淀等。

3.2CRISPR-dCas9系统.png

Figure 8 : The Cas9 null mutant has lost both of its DNA cleavage domains while still retaining its ability to target genomic loci through gRNA:DNA interactions. By fusing effector domains to the Cas9 null mutant, it is possible to activate gene expression (i.e. V964 or NF-kB), repress gene expression (i.e. KRBA domain), visualize genomic loci (i.e. EGFP), perform chromatin remodelling (i.e. TET proteins), and simplify chromatin immunopercipitation (through an antibody epitope tag)



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